Title: Cambios morfológicos, proteicos, glicoproteicos y antigénicos de Trypanosoma cruzi cultivado en medio axénico con tensiones de oxígeno diferentes
Author: Graterol, Diana; Arteaga, Rosa; Castillo, Ángel; Díaz, Gabriel; Mundaray, Oriana; Pineda, Wilmer; Navarro, María C; Domínguez, María; De Lima, Ana Rita; Contreras, Víctor T
Abstract: Se ha reportado cultivo axénico de amastigotas de
Trypanosoma
cruzi
derivados de epimastigotas. Se cuestiona si formas redondas
en cultivos axénicos son verdaderos amastigotas. Aquí se
compararon los cambios biológicos y moleculares de epimastigotas
creciendo en alta y baja tensión de oxígeno.
T. cruzi
(EPm6) se
creció en frascos con diferentes alturas de medio LITB (condición
horizontal 3 mm y vertical 83 mm). Se colectaron masas de
parásitos de diferentes tiempos de crecimiento para análisis
proteico, glicoproteico y antigénico. Se estudiaron los cambios
morfológicos, incremento de inóculo y resistencia al complemento
por microscopia de fases y tinción con Giemsa. Los cambios
proteicos y glicoproteicos se compararon por SDS-PAGE. Los
cambios antigénicos se analizaron por Western blot con suero de
conejo y anticuerpos IgY contra formas amastigotas. En condición
vertical, los epimastigotas mantuvieron su morfología típica a lo largo
de la curva de crecimiento y no mostraron cambios moleculares
significativos. En condición horizontal al 4to y 6to día predominaron
formas redondas con capacidad de resistir la lisis por complemento.
A partir del 4to día se observaron cambios en los perfiles proteicos
y glicoproteicos, concomitantemente con los cambios morfológicos.
El suero anti-amastigotas reveló un antígeno amastigota-específico
transitorio de 55 kDa en parásitos de 4 días en la condición
horizontal, mientras el anticuerpo IgY anti-amastigotas no reveló
diferencias entre parásitos creciendo en ambas condiciones. Estas
evidencias sugieren que epimastigotas de
T. cruzi
condicionados a
sobrevivir en alta tensión de oxígeno puede mimetizar propiedades
biológicas y antigénicas propias del estadio amastigota